化学蛋白质组学发现WRN解旋酶的共价变构抑制剂

  (a)在WRN I型(蓝色)和II型(红色)抑制剂系列中的所有剖面化合物中的脱靶半胱氨酸,TNFAIP3 C54的活细胞和裂解物TE50。(b)在复合预孵育期间没有/具有0.2 mM ATP的HWRN519–1227的旋转酶活性比裂解液/活细胞中TE50S的比率表明ATP合件化合物是与活细胞相同的ATP合件化合物。(c)VVD-127101的全球TMT半胱氨酸分析。(d)VVD-133214在4个细胞系中的目标参与(WRN C727)的剂量反应曲线:HCT-116(灰色圆圈),DLD-1(白色正方形),SW480(黑色三角形)和OCI-AML2(圆圈)。筛选线OCI-AML2在裂解液(黑色圆圈)和活细胞(白圆圈)之间的比较。(e)评估VVD-133214的抑制小鼠WRN解旋酶(片段486–1232)(MWRN486–1232)和(f)在复合预孵育期间使用ATP和没有ATP的HBLM活性。(g)通过VVD-133214,VVD-129448的非共价类似物缺乏WRN解旋酶抑制活性。(H)使用重组WRN的完整蛋白质质谱法测定了VVD-133214的反应动力学。随着时间的流逝,观察到抑制剂浓度变化的WRN的共价修饰速率。KOBS/[i]被确定为4848 M-1S-1(I)在存在VVD-133214的情况下,HWRN519–1227分叉DNA结合,并通过HTRF孵育ADP。(j)启动了在解旋酶反应后通过VVD-133214对时间依赖性抑制WRN解旋酶活性的抑制作用。(i)评估VVD-133214对几种WRN构建体的解旋酶活性的评估(ATPASE域HWRN532–948,C946S,Helicase Core HWRN519-1093,HERICase核心,具有HRDC域HRDC域HRWRN519-127-1227的HELICase Core,以及完整的长度WRN HWRN HWRN1-1432)。数据表示为均值±SEM。

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评论列表(3条)

  • admin的头像
    admin 2026年01月12日

    我是博钧号的签约作者“admin”

  • admin
    admin 2026年01月12日

    本文概览:  (a)在WRN I型(蓝色)和II型(红色)抑制剂系列中的所有剖面化合物中的脱靶半胱氨酸,TNFAIP3 C54的活细胞和裂解物TE50。(b)在复合预孵育期间没有/具有0...

  • admin
    用户011201 2026年01月12日

    文章不错《化学蛋白质组学发现WRN解旋酶的共价变构抑制剂》内容很有帮助