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在这项研究中，我们分析了Allo-HCT患者的肠道细菌组，并揭示了肠球菌的统治。从粪肠球菌预言测序数据中鉴定出的内olysin显示出生物膜形成大肠杆菌。该内溶蛋白根除的细胞蛋白酶阳性毒性E.粪便在肠道中的给药，并抑制了AGVHD的加剧。
在我们的研究中，在65.2％的Allo-HCT患者中观察到肠球菌支配（图1A，B），急性白血病与肠球菌统治的高发生率显着相关（补充表3），与先前的研究一致。由于急性白血病的患者与其他疾病的患者相比，在Allo-HCT面前高度增强的化学疗法和广谱抗生素的循环更多，因此，根据先前的研究47，可能已经引起了肠道障碍和肠道障碍性疾病的功能障碍。先前的一份报告表明，生活在生物膜中的细菌对抗生素的耐药性要比浮游细菌具有更大的耐药性。因此，生物膜形成的肠球菌可能能够在Allo-HCT患者的肠道中保持占主导地位。
抗菌敏感性测试证实，在这项研究中，所有分离的粪肠球菌和粪菌菌株都不是VRE（扩展数据表1）。此外，通过培养223种由肠球菌在VRE选择性琼脂上占主导地位的粪便样品，不能通过培养VRE菌株。因此，不太可能获得对糖肽或恶唑烷抗生素的抗性（这是在Allo-HCT期间最常服用的抗生素以防止感染），以促进肠道中肠球菌占主导地位的发展。然而，所有分离的粪肠球菌菌株，而不是具有细胞溶蛋白基因的粪肠菌株（扩展数据图2B），表明这些细菌具有高度毒性。实际上，肠道中肠球菌统治的高发生率与ALLO-HCT18患者的AGVHD发生和较高的死亡率相关。因此，抑制生物膜的形成并消除粪肠球菌将是Allo-HCT患者的有效临床方法。
与E.粪菌菌株相比，与生物膜形成相关的几个KO术语的水平（包括K01791，K05496，K07173和K08605）的几个KO术语水平增加了与生物膜形成相关的几个KO术语水平的升高，与E.粪菌株相比（图1B）。先前已经在无菌小鼠模型中显示了粪肠球菌通过形成生物膜49的天真肠道上皮的能力。K01791和K05496分别与WECB和TAGA基因相关的KO术语，它们在多糖生物合成50中起着专门的作用。K07173是与LuxS基因相关的KO术语，该术语涉及法定感测和生物膜形成51,52。K08605是与Gele基因相关的KO术语，这对于产生明胶酶并有助于生物膜形成至关重要。53,54。先前的一项研究表明，粪肠球菌产生的金属蛋白酶Gele损害了肠上皮屏障的功能，并诱发了IL-10 - / - - / - 和TNFΔARE/WT小鼠的慢性炎症55，这表明除了cytolysin，Gele可能是AGVHD的cytolysin可能是一个临床目标。
由于粪肠球菌是一种革兰氏阳性细菌，因此可以预测，内叶蛋白（特别是水解肽聚糖并参与生物膜的形成）会降低肠中粪肠球菌的统治。几项研究报道了噬菌体序列的荟萃分析的内olysins鉴定25,56。在我们先前的研究中，我们表明，基于元基因组 - 分析的有关宿主细菌 - 噬菌体关联的信息可用于检测特异性控制病原体的噬菌体衍生抗菌酶25。在我们目前的研究中，我们从大肠杆菌预言测序数据中检测到独特的内溶蛋白（图2b和补充图2），并提供了其针对粪肠球菌菌株的裂解活性的证据，但不是来自具有异源性数据的患者（图2D和扩展数据的患者）。值得注意的是，鉴定出的内olysin消除了生物膜的形成（图2E，F），并保护了AGVHD（图3B和4D）。此外，与细胞溶胶蛋白酶阴性的E. faecalis菌株JCM5803，E。Faecium菌株患者019_4_1和大肠菌菌株患者患者和大肠杆菌菌株患者025_0_122相关的病例，与AGVHD相关的死亡率没有升高（扩展数据图7）。将需要进行未来的研究来确定这种治疗方法是否对AGVHD患者有效。
在考虑内olysin对粪肠球菌的可能临床应用时，酶对粪肠球菌的特异性将是理想的特征。实际上，内olysin的裂解光谱范围从物种特异性到靶向多个属。先前的研究表明，肠球菌噬菌体裂解蛋白（例如，PLYV12和EFAP-1）具有广谱杀伤能力57。但是，在我们的研究中，内olysin裂解了粪肠球菌，但没有粪肠球菌或其他肠道细菌（图2D -F和扩展数据图3-5）。因此，以及先前报道的58的粪肠球菌特异性内溶素lysef-p10，我们所鉴定的内olysin可能是一种狭窄的谱酶，这将使它成为消除粪肠球菌的理想候选者。
在本研究中，在30例肠球菌中，有7例是AGVHD阳性和细胞溶蛋白阳性的阳性，其中4个为AGVHD阳性，3个阳性，细胞胞菌素阴性为3个，AgVHD阴性为AGVHD阴性和cytolysin阳性，16个阳性和16个阳性和16均为AGVHD阴性和cytolysin-ster-dester-dester-dester-dester-decter-decter-decter-decter-decter-nd-t-twip <0.0141。（补充表2）。尽管样本量很小，但我们的研究是我们的研究（我们所知）不仅显示了粪便细胞托素蛋白阳性与AGVHD发展之间的临床关联。因此，在治疗策略的设计中，粪肠球菌的细胞溶素阳性与ALLO-HCT患者的AGVHD发展之间的关系应该是一个关键考虑因素。
这项研究有几个局限性。为了研究内olysin对AGVHD的影响，但没有慢性GVHD，我们只给予内olysin三周，观察到一个月的存活率。未来的研究可以评估细胞溶素阳性大肠杆菌是否有效抗慢性GVHD。此外，我们目前的队列研究的样本量较小，排除了对Allo-HCT患者的细胞蛋白酶阳性大肠杆菌和AGVHD严重程度的详细研究。However, according to previous reports, E. faecalis-derived cytolysin lyses bacterial cells, as well as eukaryotic cells, in response to quorum-sensing signals59, indicating that cytolysin-positive E. faecalis, not cytolysin-negative E. faecalis, has a greater ability to proliferate as a result of the suppression of competing bacteria in the intestinal tract of patients withAllo-HCT。在本研究中，与细胞溶蛋白阳性大肠杆菌和肠球菌为主的肠道微生物组的病例中，与AGVHD相关的死亡率增加，但在细胞溶蛋白蛋白蛋白蛋白蛋白蛋白菌群或肠道脂肪组的情况下没有增加。将需要未来的研究来解决Allo-HCT患者的AGVHD发病机理的细胞溶蛋白阳性大肠杆菌。此外，尽管在这项研究中我们并未在所有肠球菌中检测到VRE，但在Allo-HCT16,17的患者中，VRE的存在是不可避免的。需要未来的研究来解决粪肠球菌衍生的内olysin是否对VRE有效。
总之，我们报告了一种调节AGVHD的新策略，该策略使用源自粪肠球菌的内olysin。除AGVHD外，肠道中的溶质性大肠杆菌已被证明与酒精性乙型肝炎患者的肝病严重程度和死亡率有关。60。粪肠球菌还通过形成生物膜引起其他抗生素难治性感染，例如感染性心内膜炎，内膜炎和导管相关的尿路感染。因此，我们的发现提出了开发新疗法的细胞溶解大肠杆菌相关疾病的可能性，以AGVHD为代表。
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文章不错《肠球菌噬菌体衍生的酶抑制了移植物与宿主病》内容很有帮助